磁珠法细胞分选因操作简便、成本低,成为实验室的“明星技术”。但看似简单的流程背后,稍不留神就会“EMO”——分选纯度暴跌、细胞死伤过半…
别慌! 本文直击几大高频痛点,带你见招拆招,轻松实现“稳赢”分选!
本文以问答的方式,就瑞贝西生物磁珠细胞分选过程中常见的问题略做说明,希望能给您带来些帮助!
首先,了解磁珠细胞分选技术的原理:
1、基于抗原/抗体的特异性识别;
2、抗体或其它修饰直接或间接偶联在磁性微珠上,从而与细胞相连进行标记(如下图);

3、磁场中标记的细胞被磁性吸附,未标记细胞首先流出,然后洗脱被吸附的细胞(阳性分选)达到细胞磁性分离的目的。

下面我们了解关于瑞贝西生物磁珠细胞分选过程中常见的问题:
1、都能分选哪些细胞?
答:理论上可以分选所有的细胞,但需要根据所分选细胞的特性开发出相应抗体的磁珠。实际上,瑞贝西生物已经开发出多款可进行人T细胞分选的磁珠。

2、需要哪些设备和试剂耗材?
答:需要的设备有:分选器(提供磁场)、分选架(为分选器提供支撑的支架);所需耗材有:分选柱(细胞分离及洗脱的容器)和磁珠。


3、分选柱是否可重复使用?
答:分选柱属耗材,不可重复使用。
4、分选的细胞纯度是多少?
答:良好的实验条件及正确的操作下,一般的纯度都在90%以上。
5、一次分选所需时间?
答:手动操作在30分钟内可完成分选,自动分选2.5-10分钟即可。
6、磁珠分选时细胞堵塞分选柱
答:细胞内杂质未去除干净,可通过细胞筛网进行过滤;
制备细胞样本时,需要对细胞进行计数,不要超过分选柱容量,细胞量太大容易堵;
细胞悬液制备的时候尽量不产生气泡,加样需缓慢,也可对缓冲液进行脱气处理;
还有一种情况就是对于易结团细胞,上柱前尽量轻轻将细胞团吹散。
7、分选后的细胞可以进行哪些应用?
答:瑞贝西生物磁性细胞分选技术,不改变细胞功能,分选细胞活性好,可用于进一步的细胞培养或细胞与分子水平的分析。
结语:
磁珠法细胞分选的核心优势在于 “精准” 与 “高效”,但成功的关键藏在每一个操作细节里:从抗体磁珠的选择、样品预处理的严谨性,到洗脱条件等各种参数的优化。遇到问题时,建议先回顾试剂盒说明书,保留分选前后的样本做流式检测对比,逐步锁定关键变量。